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              色譜柱常見問題的成因和進行適當清洗的意義
            1. 發布日期:2015-10-26      瀏覽次數:1650
              • 色譜柱常見問題的成因

                        1、硅羥基的死吸附:硅膠粒子表面存在硅羥基,這些硅羥基會吸附樣品和流動相中的很多物質,當吸附達到飽和時就會出現柱效下降、峰形劣化的現象。有些吸附是可逆的,可以通過清洗解決。
                 
                        2、重金屬離子:重金屬以金屬氧化物的形式殘存在硅膠離子的表面,這些金屬氧化物很容易與其它化合物形成螯合物,使其被氧化,造成峰形劣化。
                 
                        3、緩沖液中鹽的析出:當流動相中含有緩沖鹽溶液,而且分析結束后,如果沒有先用水進行沖洗,而是直接用純有機相沖洗,瞬間柱子中的微環境是高有機相、低水相。這是流動相中的緩沖鹽溶液極易5析出鹽分,將柱子堵塞,使柱壓升高,柱效下降。
                 
                        4、色譜柱變干:如果對色譜柱保存不當,使色譜柱中的保存液全部揮發,柱子內部變干,造成色譜柱的損傷,會影響分離效果。
                 
                對色譜柱進行適當清洗的意義
                     
                        部分色譜柱故障可以通過適時、適當的清洗等到解決,恢復色譜柱的功能,延長色譜柱的使用壽命。
                 
                       具體的沖洗方法要根據實際情況做適當的選擇和調整,不同的用戶和色譜產品廠商對自己的色譜柱會有不盡相同的處理方法。新柱在使用前應先認真閱讀說明書及性能測試報告,了解柱子的性能指標。分析用的流動相往往與柱子的保存試劑不同,故在分析樣品之前,應使用合適的試劑將柱子中的保存試劑清洗出來。要注意清洗用的流動相與保存容積的相容性。
                 
                        正相柱或稱極性色譜柱一般保存在正庚烷或正乙烷中。如果分析時的流動相含有極性溶劑,應使用乙醇或異丙醇沖洗,流速0.1-0.3ml/min,將保存液沖洗干凈后,再用流動相平衡。
                 
                       鈣柱等糖柱只能用純水作流動相進行沖洗,有機溶劑會造成色譜柱損壞,尤其要注意。沖洗后可以記錄色譜柱的一些性能指標,如柱效、柱壓等,供以后參考。分析樣品前,要用流動相對色譜柱進行平衡,待基線平穩后再進行分析。一般用流動相平衡的時間為30min,若系統中有鹽或水,平衡時間應延長。
                 
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