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              水產品中孔雀石綠固相萃取凈化方法
            1. 發布日期:2010-05-21      瀏覽次數:3314
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                水產品中孔雀石綠固相萃取凈化方法
                1. 樣品前處理
                稱取5.00g切碎的樣品,依次加入1mL鹽酸羥胺(0.25g/mL)溶液、2mL對-甲苯磺酸(1.0mol/L)溶液、2mL乙酸銨緩沖溶液(0.1mol/L)和40mL乙腈,勻漿2min (10000r/min),離心3min(3000r/min),將上清液轉移到250mL分液漏斗中,用20mL乙腈重復提取殘渣一次,合并上清液。于分液漏斗中加入30mL二氯甲烷、35mL水,振搖2min,靜置分層,收集下層有機層,再用20mL二氯甲烷萃取一次,合并二氯甲烷萃取液,45℃旋轉蒸發近干。
                2. SPE凈化
                a. 活化:PRS柱,依次用3mL乙腈、3mL甲酸溶液活化;中性氧化鋁柱,用5mL乙腈活化;
                b. 上樣:將中性氧化鋁柱AL-N串接在PRS柱上方。用6mL乙腈分三次(每次2mL)用旋渦震蕩器渦旋溶解上述提取物,并依次過柱,控制柱流速不超過0.6mL/min;
                c. 淋洗:再用2mL乙腈淋洗中性氧化鋁柱后,棄去中性氧化鋁柱。依次用3mL 2%(v/v)甲酸溶液、3mL乙腈淋洗PRS柱,棄去流出液;
                d. 洗脫:用4mL5%(v/v)乙酸銨甲醇溶液洗脫,洗脫流速為1mL/min,用10mL刻度試管收集洗脫液,用水定容至10.0mL,樣液經0.2μm濾膜過濾,待測。
                3. HPLC-MS/MS檢測
                液相色譜-串聯質譜條件
                a) 色譜柱:Pursuit C18柱,50mm×2.1mm×3μm;
                b) 流動相:乙腈:5mmol/L乙酸銨(75:25, v/v);
                c) 流速:0.2mL/min;
                d) 柱溫:35℃;
                e) 進樣量:10μL;
                f ) 離子源: ESI,正離子;
                g) 掃描方式:多反應監測MRM。
                4. 樣品組分
                孔雀石綠、氘代孔雀石綠、結晶紫、氘代隱色孔雀石綠、隱色孔雀石綠和隱色結晶紫
                本方法中使用的SPE柱:
                Bond Elut PRS(500mg,3mL, PN.12102039)和Bond Elut AL-N(1g,6mL, PN. 12256086 )。
                Tips:
                本方法滿足國家標準關于水產品中孔雀石綠檢測的要求!
                 
                我公司可提供產品: Bond Elut PRS(500mg,3mL, PN.12102039)
                                                    Bond Elut AL-N(1g,6mL, PN. 12256086 )
                北京東方惠普科技有限公司
                詳情可致電:010-820178366/68
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